Avaliação da produção e purificação de esporozoítos no modelo experimental Anophelesdarlingi – Plasmodium vivaxvoltar para a edição atual

O combate à malária vivax tem sido substancialmente limitado pela ausência de uma cultura in vitro contínua de estágios sanguíneos de Plasmodium vivax, bem como de um modelo in vitro para compreender seus estágios dormentes, os hipnozoítos. A disponibilidade de uma platafoma de produção e infecção do modelo experimental Anopheles darlingi - P. vivax com isolados locais poderá abrir caminhos para estudos na região Amazônia com novos compostos ativos contra a malária, bem como testagem de candidatos a vacina, a partir da implementação de infecções de hepatócitos in vitro. Para o sucesso dos ensaios de invasão e considerando a produção média atual de esporozoítos na PIVEM, nesse projeto estamos buscaremos estabelecer um protocolo padrão de infecção de An. darlingi para aumentar a produção de esporozoítos de P. vivax por meio de infecção artificial com substituição do plasma sanguíneo, e com tratamento dos mosquitos com antibióticos e com ácido paraminobenzóico (PABA). E ainda, testaremos métodos de purificação de esporozoítos visando redução do tempo de dissecção das glândulas salivares e a carga microbiana contaminante para aumentar o sucesso dos testes de invasão de hepatócitos. Os ensaios de substituição do plasma sanguíneo foram realizados nos últimos meses e já demonstraram resultados satisfatórios com aumento significativos na taxa de infecção e na intensidade de oocistos e esporozoítos dos mosquitos submetidos a infecção artificial. Os resultados preliminares demonstram que é possível a manipulação artificial de modo a favorecer a produção de esporozoítos para os experimentos pretendidos de invasão de hepatócitos.