COMPARAÇÃO DE DUAS METODOLOGIAS DE IDENTIFICAÇÃO DE FUNGOS FILAMENTOSOS ISOLADOS DE UMA UNIDADE FARMACÊUTICA PRODUTORA DE IMUNOBIOLÓGICOSvoltar para a edição atual

Bio-Manguinhos é a unidade da Fiocruz produtora de vacinas, reativos e biofármacos. Durante a produção de vacinas, rígidas normas devem ser seguidas para a obtenção de produtos seguros e o conhecimento da microbiota associada a esses processos é estratégico para a adoção de medidas preventivas ou corretivas, assim como na avaliação dos riscos associados. Vários grupos microbianos podem estar presentes como contaminantes de áreas limpas, como os fungos, cujo método convencional de identificação é baseado nas características morfológicas da cultura e das estruturas de reprodução, o que demanda um longo tempo. A Espectrometria de Massas por Ionização/Dessorção a Laser Assistida por Matriz por Tempo de Voo (MALDI-TOF MS) é uma metodologia rápida, de simples execução e de baixo custo. No entanto, a deficiência das bases de dados quanto a espécies de origem ambiental representa uma limitação para aplicação nas indústrias farmacêuticas. Por outro lado, metodologias genotípicas demonstram eficiência e confiabilidade na identificação de fungos, embora sejam dispendiosas e laboriosas. De 2018 a 2020, foram isoladas 127 linhagens de fungos em Bio-Manguinhos: 60% foram identificadas em nível de gênero e 40% não foram identificadas, o que demonstra a necessidade de metodologias mais eficazes. O objetivo deste projeto é identificar fungos filamentosos isolados em Bio-Manguinhos através de análise proteômica e sequenciamento genético. Serão selecionadas cerca de 50 linhagens de fungos isolados de diferentes fontes durante a cadeia produtiva de Bio-Manguinhos, de 2018 a 2020. Será realizada a caracterização macroscópica e microscópica. Após a manipulação, os isolados fúngicos serão preservados em solução salina tamponada a 2-8ºC. As linhagens serão identificadas por análise proteômica em VITEK® MS; e por sequenciamento da região D2 da subunidade 28S do DNA fúngico. Finalmente, o poder discriminatório de cada técnica será calculado utilizando-se o Índice de Simpson. Espera-se, com este projeto, ampliar a capacidade de identificação de fungos em nível de gênero/espécie do Laboratório de Controle Microbiológico de Bio-Manguinhos, o que auxiliará na tomada de ações preventivas e corretivas, assim como na avaliação dos riscos associados aos processos produtivos de vacinas, reativos e biofármacos.