Detecção de Mycobacterium leprae através PCR quantitativo para auxiliar o diagnóstico da hanseníase em países endêmicos. voltar para a edição atual

Estudos epidemiológicos atuais utilizam técnicas de genotipagem molecular através da análise de repetições em tandem (micro e minissatélites) de número variável (VNTRs). A análise de VNTR de Múltiplos Locus (MLVA) é um procedimento útil que permite identificar subtipos de isolados, distinguir reativação de reinfecção e estudar a estrutura da população bacteriana em diferentes localidades com base no número de cópias de VNTR, mesmo entre cepas bacterianas altamente relacionadas (Fontes et al., 2017). Esta técnica, bem como outras utilizadas para identificação e detecção de mutações associadas à resistência, requer uma grande quantidade de DNA, sendo assim, o tipo de espécime clínico e o procedimento de extração de DNA influenciam no desempenho do diagnóstico molecular e consequentemente, nos estudos epidemiológicos (Martinez et al., 2011). O Laboratório de Biologia Molecular Aplicada à Micobactérias em colaboração com o Laboratório de Hanseníase e com a Unidade de Micobacteriologia do Instituto de Medicina Tropical (ITM/Bélgica) desenvolve estudos sobre a transmissão e sobre os mecanismos de resistência à drogas utilizadas no tratamento da hanseníase, no Brasil e em Comores, país localizado na costa sudeste da África que está entre os 22 países considerados com maior carga absoluta ou relativa de hanseníase. Um dos objetivos deste dois grupos é a concepção e validação de um procedimento em um painel de sequenciamento de genes direcionados (Deeplex-MycLep), utilizando sequenciamento de nova geração para a genotipagem simultânea de Polimorfismos de Base Única (do inglês single nucleotide polymorphism – SNPs), repetições em tandem (do inglês Short Tandem Repeats – STRs) e a detecção de resistência a drogas em parceria com a GenoScreen. O objetivo deste subprojeto de pesquisa é dar suporte através da qPCR e das técnicas clássicas de genotipagem para a validação do Deeplex-MycLep.