Análise por Sequenciamento de Nova Geração (SNG) de microRNAs a partir de amostras sorológicas de gestantes com complicações obstétricas atribuídas as arboviroses (dengue, Zika e chikungunya).voltar para a edição atual

Gestantes constituem um dos grupos mais vulneráveis às infecções arbovirais devido às modificações hormonais, imunológicas e fisiológicas ocorridas durante o período. Várias complicações obstétricas têm sido associadas às infecções por arbovírus, porém os mecanismos ainda não estão totalmente compreendidos. Mecanismos epigenéticos constituem a interface entre o genoma humano e fatores de risco individuais e ambientais, como o estilo de vida e a influência ambiental. O contato com um agente infeccioso pode alterar estes mecanismos no hospedeiro produzindo biomarcadores, como anticorpos, interleucina, que podem ser alvos a serem utilizados em ferramentas diagnósticas e terapias. Os microRNA’s (miRNA’s) são as menores moléculas de RNAs eucarióticas funcionais conhecidas (~22 nucleotídeos de comprimento) e têm sido um dos alvos epigenéticos amplamente estudados. Algumas famílias de miRNAS já foram identificadas como biomarcadores envolvidos na proteção ou na progressão das infecções virais. Entretanto, o papel desses marcadores nas infecções arbovirais, em especial Chikungunya, ainda é pouco estudado, particularmente entre gestantes expostas a tais infecções. Esse subprojeto está inserido numa proposta maior, inovadora, e tem como objetivo definir os perfis de expressão dos miRNAs gestantes com complicações obstétricas atribuídas as arboviroses. A estudante desenvolveu atividades que compreendem a recepção das amostras, a separação do soro e formação do banco de amostras, construção da biblioteca de miRNA e manuseio do RNA-Seq para o SNG das amostras. Durante os 12 meses previstos (agosto/2022 a julho/2023), a estudante continuará a realizar levantamento bibliográfico e participar das reuniões científicas da equipe de pesquisa, com apresentação de artigos no tema de estudo. Ainda, quantificará por qPCR os miRNAs nos meses 1 a 4, analisará a expressão dos miRNAs nos meses 5 a 6, comparará os miRNAS mais expressos através de qPCR nos meses de 7 a 9, e nos três últimos meses se dedicará a escrita do relatório final. Nos últimos seis meses, a estudante também eleborará relatório parcial e participará da divulgação de dados em eventos científicos, além da escrita de um artigo. Referências bibliográficas: Chen YC, Wang SY. Activation of terminally differentiated human monocytes/macrophages by dengue virus: productive infection, hierarchical production of innate cytokines and chemokines, and the synergistic effect of lipopolysaccharide. J Virol. 2002; 76(19):9877–87; GOVINDARAJAN, M. et al. One-pot biogenic fabrication of silver nanocrystals using Quisqualisindica: Effectiveness on malaria and Zika virus mosquito vectors, and impact on non-target aquatic organisms. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2016; GUBLER, D.J. Human Arbovirus Infections Worldwide. Annals New York Academy Of Sciences, v.951, p.13-24, 2001; Nag D, et al. DNA forms of arboviral RNA genomes are generated following infection in mosquito cell cultures. Virology. 2016 Nov;498:164-171; Quintanilla, S, Barruetos, E. 2015. Fiebre Chikungunya. Acta Pediátrica Hondureña 5 (1-2), 371-77; Weaver SC, Vasilakis N. Molecular evolution of dengue viruses: contributions of phylogenetics to understanding the history and epidemiology of the preeminent arboviral disease. Infect Genet Evol. 2009;9(4):523-40.