AVALIAÇÃO DOS EFEITOS DE UMA DELEÇÃO GENÔMICA DETECTADA EM ISOLADOS AMERICANOS DE LEISHMANIA INFANTUM SOBRE ASPECTOS BIOLÓGICOS DO PARASITAvoltar para a edição atual

As estratégias de ganho de aptidão de patógenos podem ser surpreendentes quando novos ciclos de transmissão se estabelecem em ambientes não-nativos envolvendo novos vetores e hospedeiros. A introdução de Leishmania infantum nas Américas durante a colonização europeia representa uma oportunidade singular para investigar os mecanismos de adaptação ecológica deste importante parasita. Definir as trajetórias evolutivas que impulsionam a aptidão de L. infantum neste novo ambiente são de grande importância para a saúde pública, pois permitirão uma visão única das vias de coevolução hospedeiro / patógeno e suas consequências para mudanças na manifestação da leishmaniose visceral (LV), doença causada por este agente. A LV é uma doença grave, endêmica no Brasil, sendo o protozoário L. infantum transmitido ao hospedeiro vertebrado durante o repasto sanguíneo da fêmea do vetor flebotomíneo. Ao realizarmos um estudo de genômica comparativa entre diversas cepas americanas e de outros continentes, detectamos uma deleção apenas no genoma de cepas brasileiras de L. infantum, em uma região codificante para duas copias da enzima 3’ecto-nucleotidase. Esta enzima trans-membranar é essencial na via de captação de purinas (principalmente adenosina - ADO) do meio extracelular pelo parasita, que é incapaz de sintetizá-las de novo. Está associada ao escape dos parasitas das redes de neutrófilos e na sua interação com os macrófagos. Cepas apresentando a deleção sub-cromossômica (DEL) foram avaliadas e os resultados demonstraram que de fato a atividade enzimática está reduzida ou ausente em formas promastigotas DEL. Além disso, essas cepas sobrevivem menos à interação com as redes de neutrófilos e infectam menos os macrófagos quando comparadas às não-deletadas. Além dos impactos biológicos, chama a atenção que a maioria das cepas brasileiras avaliadas (71/91) apresenta a deleção, sugerindo maior fitness. Sabe-se que a ADO extracelular gerada pela ação das ecto-nucleotidases do parasita e do hospedeiro tem efeito na via de sinalização purinérgica, inibindo a produção de citocinas inflamatórias e a produção de moléculas microbicidas por neutrófilos e macrófagos. Adicionalmente há ADO na saliva do inseto inoculada no momento da picada. Assim, essa intrincada combinação nos momentos iniciais da infecção pode ter um efeito importante no desenvolvimento da doença. Diante disso, o objetivo do projeto principal onde esta proposta está inserida é compreender como a atividade enzimática é modulada nesses dois genótipos e se de fato seus efeitos alteram o fitness do parasita no hospedeiro vertebrado contribuindo para sua alta ocorrência entre cepas brasileiras de L. infantum. O objetivo específico do presente subprojeto de iniciação científica é determinar in vitro o efeito modulador que a presença purina (ADO) tem sobre a expressão da enzima, sobre s replicação dos parasitas e sobre a metaciclogênese nos distintos genótipos de L. inafntum.