ESTUDOS MOLECULARES EM FLEBOTOMÍNEOS NO MUNICÍPIO DE BRUMADINHO, MINAS GERAIS: RELEVÂNCIA DO DESASTRE DO CÔRREGO DO FEIJÃO NA EPIDEMIOLOGIA DAS LEISHMANISOES NA REGIÃOvoltar para a edição atual

As leishmanioses são doenças classificadas como negligenciadas e sua transmissão ocorre através da picada de fêmeas hematófagas de flebotomíneos. Sua distribuição geográfica é dependente de capacidade e se adaptar a diferentes nichos ecológicos. Existem estudos que indicam que ações antrópicas nos ecossistemas podem ocasionar na alteração da dinâmica de diversas zoonoses bem como também o seu padrão de transmissão. As leishmanioses fazem parte desse grupo de zoonoses, uma vez que possuía origem silvestre, mas nos últimos anos vem apresentando modificação no seu perfil epidemiológico, sendo encontradas em meios urbanos e peri urbanos, aumentando o risco a saúde humana e animal. Entre os anos de 2013 e 2015 o nosso grupo, realizou um estudo para analisar o cenário epidemiológico de Brumadinho frente as Leishmanioses, como resultado foram capturados 16.771 flebotomíneos de 23 espécies, sendo algumas vetores comprovadas de Leishmania spp. como: Nyssomyia whitmani, Nyssomyia intermedia e Migonemyia. Migonei. Foram realizados estudos moleculares para identificação de presença de DNA de Leishmania, sendo encontrada a circulação de Leishmania amazonensis e Leishmania braziliensis em alguns exemplares capturados. Posteriormente foi analisado a fonte alimentar das fêmeas ingurgitadas capturadas onde foi verificado que se alimentaram em cães, galinhas, seres humanos e ratos. No município de Brumadinho, localizado no estado de Minas Gerais ocorreu no ano de 2019 um dos maiores desastres ambientais no Brasil, ocasionando na liberação de rejeitos provenientes da produção mineral. Com objetivo de verificar o impacto desse desastre frente as leishmanioses na região, vamos realizar um estudo molecular comparativo com os dados obtidos antes do rompimento da barragem. Posteriormente será confeccionado um material didático, contendo informações sobre a dinâmica da enfermidade do município e medidas de prevenção e controle das leishmanioses. Diante disso, nosso objetivo é detectar DNA de Leishmania em flebotomíneos, bem como determinar determinar a fonte alimentar nas fêmeas com resquícios de sangue em seu abdômen. O município de Brumadinho (20º 08' 36" S e 44º 11' 59" W) está localizado no estado de Minas Gerais, abrangendo uma área de 639,434 km² com população total estimada de 41.208 habitantes (IBGE, 2021). O clima do município é caracterizado como clima quente, encontrando-se na zona de clima tropical Brasil central. O município faz parte de uma área territorial que integra o denominado Quadrilátero Ferrífero, região rica em campos ferruginosos, sustentando a principal base econômica de Brumadinho, as atividades de mineração, sobretudo pela atuação da Vale S.A. Apresentando em sua extensão territorial impactos ambientais causados pelas ações antrópicas. Os flebotomíneos serão coletados em 23 pontos com auxílio de armadilhas luminosas automáticas, modelo HP, durante três noites consecutivas, durante o período de março de 2022 a abril de 2023. O material coletado será armazenado em álcool 70% e posteriormente os machos serão montados líquido de Berlese e as fêmeas serão dissecadas, tendo os últimos segmentos e a cabeça colocadas em lâmina para identificação e o tórax, pernas e demais segmentos do abdômen serão armazenados para a análise molecular para detecção de DNA de Leishmania e determinação da fonte alimentar nas fêmeas ingurgitadas. Todos os espécimes capturados serão identificados através da classificação proposta por Galati (2003). As fêmeas dos flebotomíneos coletadas serão submetidas à extração total do DNA individualmente e em pool (para até dez indivíduos da mesma espécie, mesmo ponto amostral e mesmo período de captura). Posteriormente o DNA extraído será submetido à PCR convencional com amplificação do fragmento da região intergênica do DNA de Leishmania (Internal Transcribed Spacer q – ITS1). Para realizar a identificação da espécie de Leishmania, o produto amplificado será direcionado a técnica de RFLP. As fêmeas alimentadas serão dissecadas e o DNA extraído para posterior identificação de fontes alimentares através da PCR dirigida ao gene do citocromo b com a confirmação pelo sequenciamento genético.