Caracterização do hábito alimentar dos mosquitos silvestresvoltar para a edição atual

Os mosquitos são extremamente importantes por seu impacto na saúde humana pois atuam como vetores de diversos patógenos como arbovírus (Zika e Chikungunya) e parasitas que causam a malária. Apesar dos mais variados estudos básicos e aplicados sobre esses insetos eles continuam sendo responsáveis por diversas mortes e casos de surtos endêmicos de arboviroses, principalmente em países tropicais. Dados da Organização Mundial de Saúde estimam que 700 milhões de pessoas perdem a vida devido a doenças de patógenos transmitidos por vetores anualmente. Os mosquitos formam um grupo hiper diverso, com mais de 3 mil espécies descritas dentro da família Culicidae e para a grande maioria dessas espécies há uma carência total de informações de biologia básica e história evolutiva. O objetivo desse projeto é caracterizar a fonte alimentar de mosquitos silvestres que podem ser encontrados no estado de Pernambuco. Para a realização do projeto foram utilizados mosquitos coletados no Zoológico e Jardim Botânico do Recife nos anos de 2018, 2019 e 2020. Esses exemplares foram analisados em uma lupa para realizar sua classificação através de chave de identificação morfológica. O DNA dos indivíduos ingurgitados de cada espécie foi extraído e submetido a amplificação do barcode COI (gene citocromo oxidase c subunidade 1) tanto do mosquito como dos vertebrados utilizados como fonte alimentar pela técnica de PCR. Os fragmentos amplificados foram submetidos a sequenciamento de Sanger, e as sequências obtidas foram submetidas a bancos de dados (BOLD - Barcode of Life Data Systems e BLAST-NCBI) para identificar a sequência de referência. Com o objetivo de aprofundar o estudo do projeto novos experimentos serão realizados com as mesmas amostras utilizadas previamente e com os mesmos primers, porém, com um diferente tipo de sequenciamento. O sequenciamento NGS será realizado a partir de fragmentos gerados por PCR convencional e também serão usados controles positivos e negativos, além de mosquitos que se apresentarem no estado pós digestão. Isto, para verificar quanto de informação podemos obter de repasse sanguíneo já degradado. Após o sequenciamento um pipeline será montado com o objetivo de testar alguns novos programas usados para caracterização de espécies, e assim, ter acesso aos resultados mais fidedignos quanto a alimentação dos espécimes em múltiplas espécies alvo.