IDENTIFICAÇÃO E GENOTIPAGEM DE LEGIONELLA PNEUMOPHILA PROVENIENTE DAS REDES DE ABASTECIMENTO HOSPITALAR NO RIO DE JANEIRO.voltar para a edição atual

Legionella pneumophila é uma bactéria aeróbia, gram-negativa, fastidiosa, formadora de biofilmes que é encontrada em ambientes aquáticos naturais, como lagos e rios, ou ambientes artificias, como redes de abastecimento e distribuição de água. Essa bactéria está essencialmente associada a duas doenças: Doença dos Legionários (DL), uma pneumonia que pode ser fatal em até 40% dos casos, e a Febre de Pontiac, um resfriado autolimitado. A contaminação ocorre pela inalação de gotículas contaminadas, portanto, é imprescindível a vigilância e a manutenção da qualidade de água dos sistemas artificiais, especialmente nos hospitais devido a exposição de pessoas imunossuprimidas. O método padrão e internacionalmente difundido para a identificação de Legionella spp. presente na água é a partir do isolamento em meio de cultura específico (ISO 11371), enquanto a técnica de genotipagem padrão é a Sequence-based Typing (SBT) que utiliza sete alelos para identificar a Sequence Type (ST) de cada isolado. Assim, este projeto tem como objetivo analisar a presença de Legionella spp. em amostras de água com foco nas amostras provenientes das redes de abastecimento hospitalar, para realizar a identificação da espécie L. pneumophila através do gene mip (macrophage infectivity potentiator) bem como o perfil molecular dos isolados através da técnica SBT. Métodos: serão coletadas amostras de água de grandes edifícios e também do sistema de abastecimento de água de hospitais com colaborações pré-estabelecidas. As amostras serão inoculadas em meio BCYE e incubadas a 35º C em ambiente rico em CO2 para averiguar a presença de Legionella spp. As culturas positivas serão submetidas a extração de DNA seguida pela PCR para identificação da espécie L. pneumophila. Por fim, os isolados de L. pneumophila serão processados de acordo com a técnica SBT para a identificação do perfil molecular das cepas.