Avaliação de proteínas recombinantes para produção de um teste-rápido para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina e humanavoltar para a edição atual

A leishmaniose visceral (LV) é um grave problema de saúde pública no Brasil, sendo o cão o principal reservatório urbano. O controle da enfermidade é baseado no diagnóstico e eutanásia de cães soropositivos para Leishmania infantum, tornando extremamente importante a acurácia dos testes diagnósticos. Um estudo utilizando soros de humanos e cães infectados por L. Infantum identificou 12 antígenos a partir de bibliotecas de cDNA. Dessa família de antígenos, as proteínas rLci1, rLci2 e rLci5, foram escolhidas por apresentarem diferença significativa teste comercial EIE-LVC® Bio-Manguinhos. Além disso, a proteína rLci5 demonstrou resultados promissores em teste de ELISA, obtendo valores de 87% sensibilidade e 94% de especificidade, resultando em uma acurácia de 90%. Dessa forma, a rLci5 foi selecionada para compor um estudo de diagnóstico de LVC em ELISA, com o objetivo de substituir e aprimorar o protocolo preconizado pelo Ministério da Saúde. No entanto, encontrou-se reatividade cruzada com tripanossomatídeos da espécie T. Cruzi, espécie que partilha similaridades genéticas com a L. Infantum. Para reverter esse quadro, análises de bioinformática (BLAST-p, Clustal Omega, BepiPred - 2.0, IEDB e BcePred) serão conduzidas com as proteínas rLci1, rLci2 e rLci5, permitindo identificar os epítopos conservados entre as espécies L. infantum, T. cruzi, Ehrlichia canis e Babesia canis, que podem ser encontrados em coinfecções, e selecionar aqueles que apresentam maior imunogenicidade apenas para Leishmania infantum. Os epitopos gerados in silico através das ferramentas de bioinormática serão comparados e selecionados para posterior avaliação junto aos epitopos identificados por ensaio de microarranjo em laboratório. Esse projeto tem como objetivo geral avaliar as características bioquímicas das proteínas rLci1, rLci2 e rLci5 in silico e em laboratório para geração de um teste rápido baseado nas proteínas como produto final, a fim de identificar domínios conservados entre as espécies, e melhorar o potencial imunogênico desses antígenos.